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電視動畫《少女愛上姐姐》改編自Caramel Box于2005年發(fā)售的十八禁戀愛喜劇冒險游戲《處女愛上姐姐（処女はお姉さまに戀してる）》（全年齡版稱為《少女愛上姐姐》）。動畫的標題采用了全年齡的PS2版《少女愛上姐姐》。 故事的主角——鏑木財閥的獨生子，長相清秀，成績出眾卻有點弱氣的的“好青年”宮小路瑞穗，因聽從祖父的遺愿，被強迫送入一所女子學園就學，為了避免很多不必要的麻煩（或者是為了制造更多麻煩？），在青梅竹馬的真里野的強烈要求下，他被迫換上了女裝，在一群姐姐妹妹當中開始了“幸?！钡男@生活，還誤打誤撞地被選為了全校學生所憧憬的“大姐樣”。在小姐云集的女學園中引發(fā)軒然大波的瑞穗同學的未來會怎么樣呢？